染色樣本的封片通常是免疫組織化學或免疫螢光工作成像前流程的最後一步 (1)。當您進入實驗的這個階段時，除了結果之外可能很難考慮任何事情，但值得花時間選擇正確的封片劑（作為入門讀物，請參閱 Vector Laboratories 的文章 封片注意事項）封片劑選擇）。在這裡，我們將深入探討一個關鍵的封片劑問題：凝固型還是非凝固型封片劑最適合您的實驗？
什麼是凝固封片劑和非凝固封片劑 （setting vs. non-setting mounting media）？
封片劑可以在乾燥（凝固）時硬化成固體膜，也可以保持液態（非凝固）。幾乎所有溶劑型（非水性）封片劑都是凝固的，因此如果您有興趣使用非凝固封片劑，您可能需要選擇水性（水性）封片劑。凝固和非凝固配方均可提供封片劑的主要功能，即物理保護標本並防止其乾燥 (1)。兩者並不比另一個更好；這完全取決於是否適合您的實驗。
您可以長期保存染色標本嗎？
凝固封片劑通常更適合長期保存，有些可以讓您將染色的玻片保持在室溫下。如果您不需要長時間保存玻片，則非凝固封片劑可能是個不錯的選擇，但請記住，使用非凝固介質封片的標本可能需要在 2–8°C 下保存。
安裝載玻片時如何防止氣泡和收縮？
某些凝固介質會發生收縮，並可能改變細胞形態的外觀。它還可能導致氣泡的形成，這些氣泡往往像微小的透鏡一樣散射光線。氣泡和收縮都會使樣品清晰、明確的視覺化變得更具挑戰性。由於非凝固介質保持液態，因此您無需擔心回縮或收縮。如果您仍想使用凝固介質，請不要擔心：Vector Laboratories 提供各種凝固和非凝固介質，可讓您的標本保持晶瑩剔透。
您可以立即在顯微鏡下查看已封片的載玻片嗎？
如果您想在封片後立即查看樣品，非凝固介質可能是最佳選擇。由於這些介質保持液態，因此在成像之前不需要硬化。另一方面，在對標本成像之前，凝固介質必須乾燥，有些需要等待長達 24 小時才能獲得最佳觀察結果。
如何密封已安裝的載玻片？
如果您選擇非凝固封片劑，您可能需要在蓋玻片邊緣塗抹密封劑（如指甲油或塑膠密封劑）以將其固定到位。您可能喜歡在成像之前對片子進行一些修整，但如果您需要安裝大量片子，此過程可能會非常耗時。此外，某些密封劑可能會導致猝滅或背景螢光 (2)。如果您想跳過此步驟，請考慮使用凝固型封片劑。
您可以反轉蓋玻片嗎？
您是那種想法比標本還多的科學家嗎？凝固型和非凝固型介質都可能對您有幫助。將載玻片浸泡在緩衝液中，可以去除封固切片的蓋玻片，讓您可以重新染色標本，然後再次封片。這也是消除安裝樣品中出現的任何不必要的氣泡的好方法 (3)。
結論
現在您已經了解了凝固型封片劑與非凝固型封片劑的優缺點，您可能需要考慮您的安裝介質還能為您做些什麼。這種出色的解決方案不僅可以保護您的標本：當您在顯微鏡下觀察樣品時，它還可以提高樣品的光學清晰度，或防止螢光訊號發生光漂白（褪色）。如果您想充分利用高品質封片劑為您的實驗提供的所有優勢，我們可以為您提供一些建議。
- VECTASHIELD® PLUS 抗褪色封片劑 是我們最新改良的封片劑，具有無與倫比的抗褪色技術，所有通道中絕對沒有固有色調或背景。借助這種強大的非凝固配方，您無需在封片後密封蓋玻片，您將能夠在一小時內查看載玻片，您甚至可以長時間存儲封片樣品而不會損失信號強度。 VECTASHIELD® PLUS 抗淬滅封片劑有兩種不同尺寸可供選擇，並帶有或不帶有 DAPI，因此您可以準確選擇最適合您的實驗的封片劑。
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既然您知道如何選擇一種能夠讓您的染色穿過終點線的封片劑，那麼實際上只剩下一個問題：接下來您會做出什麼令人難以置信的發現？如果您在過程中遇到任何問題，請查看我們的 SpeakEasy 科學部落格 以及 協議和用戶指南 ，以獲得染色工作流程每一步的支援。我們隨時為您提供協助！
References :
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拉維庫馬爾 S 等人。 2014。 NTR 健康科學大學博士雜誌。
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亞利桑那大學。 2004. 光學顯微鏡：技巧。
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Bekkouche BMB 等人。 2020。 神經解剖學前沿。
