使用Immunohistochemistry (IHC)生物標記指南，為您的研究選擇正確的生物標記和最佳 IHC 抗體。
生物標記在癌症研究中的作用
癌症生物標記對癌症研究的進展和執行產生巨大的影響。癌症生物標記在研究中扮演著重要角色，從鑒定新的生物標記以改善診斷和藥物研發，到橫跨癌症類型和分期的生物標記驗證，或者優先考慮轉化為臨床前研究的目標。生物標記已經成為標靶藥物研發和將患者分類的核心，具有生物標記的臨床試驗比沒有生物標記的試驗更有可能成功。此一領域的持續研究為新的生物標記帶來希望，也增加了對當前生物標記的驗證和應用，進而改善所有癌症類型的診斷和治療。
癌症生物標記研究中的Immunohistochemistry
Immunohistochemistry(IHC)在癌症研究中是一種常用的工具，也是臨床癌症診斷的黃金標準。每種癌症都與特定的蛋白質生物標記相關，可以透過IHC來辨識，為研究腫瘤發展和反應提供強大的工具。透過使用IHC技術，研究人員可以辨識腫瘤的組織起源、病程分期、預測腫瘤預後以及檢測治療反應。由於癌症的生物標記並不存在絕對特異性，因此了解每個與腫瘤相關的生物標記的用途和潛在問題是非常重要的，也可以避免潛在的診斷錯誤。
與其他診斷方法相比，IHC檢測非常快速、簡便且低成本。因此IHC可以說是強大可靠的技術，搭配良好特異性生物標記組合，非常適合快速臨床診斷的使用。
IHC抗體的選擇
無論對哪種癌症類型感興趣，重要的是要使用靈敏、專一性且一致的IHC抗體。抗體驗證是確保抗體特異性和再現性的關鍵。abcam使用各種實驗應用來驗證抗體，也可以看到在目錄產品許多抗體都會註明其應用性。
為了在IHC實驗中獲得一致的結果並確保研究的長期可行性，建議使用透過重組技術生成的抗體(recombinant antibodies)。重組抗體是在體外生產的，不需依賴動物的免疫系統進行生產，代表每批抗體產品都能提供一致的效果。
驗證癌症生物標記的IHC抗體
IHC可確認目標蛋白在細胞的定位，並且也越來越常作為快速且較低成本的檢測標靶藥物效果，突顯其在診斷中的重要性。對於癌症等疾病的生物標記物通常透過IHC分析來獲得重要的診斷和預後資訊，以及檢測治療效果。
在進行IHC分析之前，抗體驗證非常重要，確保抗體對目標物具有特異性且足夠靈敏，以便進行病理分析。然而判讀IHC分析中的陽性和陰性訊號可能會有困難性。除了石蠟包埋切片中抗原修復的問題外，在不同分析方法中的抗原形式的差異也會影響，例如在WB上辨識單一條帶的抗體可能在IHC中有機會辨認多種蛋白。因此在驗證上通常是將實驗樣本、陽性和陰性對照樣本染色進行比較，並證明使用多種針對同一目標的抗體可以獲得類似訊號。
對於癌症生物標記抗體進行早期驗證可以增加對結果的信心，有助於更好理解目標物。使用已驗證抗體確保結果長期可重複性，並且更容易轉換到到臨床階段。
abcam對IHC抗體進行嚴格的驗證，以確保抗體的專一性、敏感性和再現性。次外也提供大量文獻引用與使用者的評論，顯現abcam抗體在許多不同實驗中實際表現情況。
IHC抗體驗證重要步驟
驗證無交叉反應:
初步可使用像是WB實驗，可輕鬆視覺化抗體的專一性。
正確的IHC染色分佈:
使用已知表達位置的陽性和陰性表達組織樣本來確認抗體在福馬林固定和抗原修復過程後仍具有特異性且結合標的。
確認相關組織的測試:
正式組織樣本中的抗體測試也是很重要，以確認抗體對於有興趣組織的特異性和靈敏性。
*當抗體在所有陽性和陰性對照樣品中重複顯示於預期位置時，抗體才能被認定是特異性。
可重複的抗體效能:
一致的抗體性能對於長期的研究非常重要。重組抗體會有其固定的序列，因此可以重複生產且不同批次的抗體差異小。Abcam重組抗體具有優異的抗原特異性、靈敏度和再現性。驗證IHC抗體的再現性需要對生產的每批新抗體進行比較，透過每個相關組織中目標蛋白的可重現、清晰的染色來確定批次之間的一致性。
實驗前先進行抗體驗證
一般會建議在開始實驗前，使用癌症生物標記抗體進行初步內部驗證。
w 對於已經成熟的IHC抗體，自己的內部驗證可以簡單透過在陽性和陰性組織上重現預期的結果來獲得適當的訊號。
w 對於新的組織、樣本或是新的癌症生物標記研究時，自行的驗證包括以前研究過的組織中的陽性對照樣品。抗體染色和訊號應與之前驗證過的組織相互匹配。使得後續能夠自行優化抗體以在感興趣的樣本中使用。
